Главная задача эритроцитов – это транспортировка кислорода в ткани и вывод их них углекислого газа. Для этого их мембраны должны обладать прочностью и эластичностью, что крайне важно при поддержании необходимого уровня объемного гомеостаза. Лабораторный метод исследования стойкости мембраны позволяет определить степень сопротивления стенки красной кровяной клетки при искусственной смене давления осмоса.
Что это такое?
Осмотическая резистентность эритроцитов характеризует их устойчивость относительно деструктивных факторов: химических, температурных, механических. При лабораторных опытах особое внимание уделяется их стойкости к гипотоническим р-рам NaCl, а именно, какая концентрация вызывает гемолиз. Нормально функционирующие клетки сопротивляются осмосу и сохранят прочность. Такая способность характеризует осмотическую устойчивость, или резистентность эритроцитов.
Если они становятся слабыми, то маркируются иммунной системой, после чего удаляются из организма.
Метод исследования
Основной лабораторный метод определения стойкости эритроцитов к разрушению – это реакция гипотонического солевого раствора и крови, смешанного в одинаковых объемах. Анализ позволяет выявить стабильность мембраны клетки. Альтернативный метод определения ОРЭ – фотоколориметрический, при котором измерения производят специальным аппаратом – фотоколориметром.
Физраствор представляет собой смесь дистиллированной воды и хлорида натрия. В растворе с концентрацией 0,85% эритроциты не разрушаются, его называют изотоническим. При более высокой концентрации получится гипертонический, а ниже – гипотонический раствор.
В них эритроциты погибают, сжимаясь в гипертоническом, и набухая в гипотоническом р-ре.
Как проводится процедура?
Определение ОРЭ проводится добавлением равного количества крови (обычно 0,22 мл) в гипотонический раствор NaCl различных концентраций (0,7-0,22%). После часа выдержки смесь центрифугируют. В зависимости от цвета устанавливают начало распада и полный гемолиз. В начале процесса раствор имеет слегка розовый цвет, а ярко красный свидетельствует о полном распаде эритроцитов. Результат выражается в двух характеристиках резистентности, имеющих процентное выражение – минимальной и максимальной.
При наличии вторичной гемолитической анемии при дефиците глюклзо-6-фосфатдигидрогеназы, анализ может показать нормальную ОРЭ, что обязательно учитывают перед проведением исследования
Показатели нормы
Норма резистентности для взрослого человека независимо от пола является следующей (%):
- Максимальная – 0,34-0,32.
- Минимальная – 0,48-0,46.
В детском возрасте до 2 лет осмотическая устойчивость несколько выше нормального показателя, а норма ОРЭ у пожилых людей, как правило, ниже от стандартного минимального показателя.
Отклонения от нормы
Резистентность и прочность мембран эритроцитов находятся в зависимости от наследственных заболеваний или особенностей патологии.
Причинами роста или падения ОРЭ выступают следующие факторы:
- Повышение стойкости эритроцитов наблюдается при механической желтухе, когда на них оседают холестериновые отложения, приобретенном или наследственном сфероцитозе, стомацитодозе, различных формах гемоглобиноза.
- Значительная кровопотеря способствует перенасыщению крови незрелыми эритроцитами и истончению их мембран. Эти же признаки характерны при наличии онкогематологии, железодефицитной анемии, иммуносекретирующих опухолей и гемоглобинопатий.
Отдельные сердечно-сосудистые болезни вызывают насыщение крови уплощенными эритроцитами, имеющими небольшой индекс сферичности, а некоторые наследственные заболевания – клетками, имеющими чрезмерно шарообразную форму. Клетки с подобными аномалиями характерны плохой резистентностью.
Причины снижения ОРЭ:
- Сердечная недостаточность, вызывающая набухание до приобретения клетками сферической формы.
- Генетически обусловленная аномалия, когда в крови находятся шарообразные эритроциты.
- При старении эритроцитов и на последних этапах их жизненного цикла. В этот период клетки становятся округлыми, а проницаемость стенок заметно возрастает.
Признаки нарушения устойчивости
Нарушение ОРЭ сопровождается следующими симптомами:
- Упадком сил.
- Отсутствием аппетита.
- Быстрой общей усталостью.
- Падением веса тела.
- Постоянной сонливостью.
- Бледностью слизистых.
- Значительным повышением температуры.
При падении устойчивости, эритроциты помечаются системой иммунитета (маркерами), и выводятся из организма селезенкой. При этом печень не успевает нейтрализовать выделившийся при разрушении клеток билирубин, в результате развивается гемолиз. При развитии такого процесса анализ крови показывает недостаток красных клеток, а организм испытывает дефицит кислорода.
Что предпринять?
При обнаружении нарушения ОРЭ, проводятся дополнительные исследования с целью выявления причины расстройства. Если патология имеет не наследственную природу, то после устранения ее причины свойства эритроцитов возвращаются в пределы нормы. Так, при анемиях проводится кортикостероидная терапия, при гемолизе назначают фолиевую кислоту, железосодержащие препараты и витамины.
При частых рецидивах заболевания возможно проведение сплеэктомии.
Профилактика
Наследственный сфероцитоз нельзя предупредить, но пациенты, страдающие данной патологией, могут обратиться к генетику, чтобы провести анализ по обнаружению дефектного гена, способного передать болезнь их детям. Профилактика наследственной формы болезни сводится к терапевтическим мерам при наступлении криза. В остальных случаях профилактические меры заключаются в обеспечении оптимальных условий для нормального кроветворения при помощи правильного питания, витаминотерапии и здорового образа жизни.
Зависимость резистентности от формы и зрелости эритроцита
Показатель осмотической резистентности находится в прямой зависимости от зрелости, формы, а также и состава кровяной плазмы.
Форму эритроцитов определяют сопоставлением размеров: диаметра и толщины, что выражают индексом сферичности. Для нормальных клеток он находится в пределах 0,27-0,28, а значительные отличия от нормы наблюдаются при отклонениях, обусловленных наследственностью, когда эритроциты имеют шарообразную форму, что значительно снижает их резистентность.
Что касается возраста красных кровяных клеток, то самыми резистентными являются эритроциты, только вышедшие из кроветворных органов, а самую высокую стойкость имеют молодые клетки плоской формы, имеющие незначительный индекс сферичности. Красные клетки, завершающие жизненный цикл, приобретают округлую форму, и имеют устойчивость 0,4-0,6% с нормой 0,32-0,44%.
Границы резистентности
Принято отмечать верхнюю и нижнюю границу резистентности. Нижняя соответствует такой концентрации гипотонического р-ра, когда распадаются самые неустойчивые эритроциты, а верхняя – концентрации, при которой за 3 часа подвергаются гемолизу все клетки. В процентном выражении верхняя норма равна 0,34-0,32%, а нижняя 0,48-0,46%.
Падение показателя менее 0,32% происходит из-за больших кровопотерь, при застойной желтухе, талассемии, гемоглобинопатии, после удаления селезенки, отдельных заболеваниях полицитемией, гемоглобинозе С. Повышение значения более 0,48% возможно при гемолитической анемии младенцев, семейной гемолитической анемии, а также при интоксикации свинцом. Расширение границы ОРЭ происходит при обострении пернициозной анемии и при остром начинающемся гемолитическом кризе.
Осмотическая резистентность эритроцитов характеризует стойкость оболочки красных кровяных клеток к деструктивным факторам. Здоровые эритроциты имеют максимальную устойчивость после выхода из органов кроветворения, а минимальную по окончании цикла жизни, после чего маркируются иммунной системой и утилизируются в селезенке. Главный метод определения ОРЭ – взаимодействие гипотонических растворов NaCl с кровью.
Анализ позволяет определить стабильность мембраны эритроцита и границы резистентности.